無菌凈化實驗室生物安全柜是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實驗材料時,用來保護操作者本人、實驗室環(huán)境以及實驗材料,使其避免暴露于上述操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設計的。但是也有幾個常見問題是需要注意的:
1、紫外燈
生物安全柜中不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話,應該每周進行清潔,以除去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢。
2、明火
在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中,應避免使用明火。
3、溢出
實驗室中要張貼如何處理溢出物的實驗室操作規(guī)則,每一位使用實驗室的成員都要閱讀并理解這些規(guī)程。
4、認證
在安裝時以及每隔一定時間以后,應由有資質(zhì)的專業(yè)人員按照生產(chǎn)商的說明對每一臺生物安全柜的運行性能以及完整性進行認證,以檢查其是否符合國家及國際的性能標準。
5、清潔和消毒
由于剩余的培養(yǎng)基可能會使微生物生長繁殖,因此在實驗結束時,包括儀器設備在內(nèi)的生物安全柜里的所有物品都應清除表面污染,并移出安全柜。
6、清除污染
生物安全柜在移動以及更換過濾器之前,必須清除污染。
7、個體防護裝備
在使用生物安全柜時應穿著個體防護服。
8、警報器
可以在兩種警報器中選擇一種來裝備生物安全柜。
分類
生物安全柜可分為一級、二級和三級三大類以滿足不同的生物研究和防疫要求。
一級生物安全柜可保護工作人員和環(huán)境而不保護樣品。氣流原理和實驗室通風櫥一樣,不同之處在于排氣口安裝有HEPA過濾器。所有類型的生物安全柜都在排氣和進氣口使用HEPA過濾器。一級生物安全柜本身無風機,依賴外接通風管中的風機帶動氣流,由于不能對試驗品或產(chǎn)品提供保護,目前已較少使用。
二級生物安全柜是目前應用尤為廣泛的柜型。與Ⅰ級生物安全柜一樣,Ⅱ級生物安全
柜也有氣流流入前窗開口,被稱作“進氣流",用來防止在微生物操作時可能生成的氣溶膠從前窗逃逸。與Ⅰ級生物安全柜不同的是,未經(jīng)過濾的進氣流會在到達工作區(qū)域前被進風格柵俘獲,因此試驗品不會受到外界空氣的污染。Ⅱ級生物安全柜的一個*之處在于經(jīng)過HEPA過濾器過濾的垂直層流氣流從安全柜頂部吹下,被稱作“下沉氣流"。下沉氣流不斷吹過安全柜工作區(qū)域,以保護柜中的試驗品不被外界塵埃或細菌污染。
按照NSF49的中的規(guī)定,二級生物安全柜依照入口氣流風速、排氣方式和循環(huán)方式可分為4個級別:A1型,A2型(原B3型),B1型和B2型。所有的二級生物安全柜都可提供工作人員、環(huán)境和產(chǎn)品的保護。
A1型安全柜前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.38m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū),30%的氣體通過排氣口過濾排除。A2型安全柜前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.5m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū),30%的氣體通過排氣口過濾排除。A2型安全柜的負壓環(huán)繞污染區(qū)域的設計,阻止了柜內(nèi)物質(zhì)的泄漏。
二級B型生物安全柜均為連接排氣系統(tǒng)的安全柜。連接安全柜排氣導管的風機連接緊急供應電源,目的在斷電下仍可保持安全柜負壓,以免危險氣體泄漏如實驗室。其前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.5m/s(100fpm)。B1型70%氣體通過排氣口HEPA過濾器排除,30%的氣體通過供氣口HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū)。B2型為全排型安全柜,無內(nèi)部循環(huán)氣流,可同時提供生物性和化學性的安全控制。
三級生物安全柜是為4級實驗室生物安全等級而設計的,是高安全防護等級的安全柜。柜體*氣密,全排放式,所有氣體不參與循環(huán),工作人員通過連接在柜體的手套進行操作,俗稱手套箱(Golvebox),試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全柜以確保不受污染,適用于高風險的生物試驗。
在允許循環(huán)化學氣體的操作條件下,可以使用外接排放管道蓋(ExhaustCollar)的A2型二級生物安全柜。排放管道蓋與一般硬管不同的是有可吸入空氣的進氣孔;排放管道蓋與外排管道連接,然后接到一個外排風機。排放管道蓋上的進氣孔對于A2型二級生物安全柜通過內(nèi)置風機保持進氣流和下沉氣流的平衡至關重要。如果使用密封的外接風管,進氣流將會過強可能導致安全柜對產(chǎn)品的保護實效;而排放管道蓋上的進氣孔可以從室內(nèi)吸入空氣,而不會影響安全柜內(nèi)的氣流平衡。此條件只適用于微量有毒化學物質(zhì)。
如果不允許循環(huán)化學氣體,則必須使用裝備硬管的B2型二級生物安全柜。由于B型安全柜不是獨立平衡系統(tǒng),它的內(nèi)置風機只能制造下沉氣流,安全柜依賴外排風機制造進氣流。這種型號的安全柜在安裝和維護時會較為復雜,因為外排風機必須與內(nèi)置風機保持平衡,否則將導致對操作人員或產(chǎn)品的安全性能的失效。
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